優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件MOI值對(duì)Lentivirus載體轉(zhuǎn)染許旺細(xì)胞的影響：以Lentivirus三質(zhì)粒系統(tǒng)構(gòu)建病毒載體，在體外對(duì)原代大鼠許旺細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染，研究不同MOI值（***復(fù)數(shù)）對(duì)轉(zhuǎn)染效率的影響32。結(jié)果顯示，在病毒轉(zhuǎn)染3天后，各不同MOI值的培養(yǎng)孔中開(kāi)始出現(xiàn)少量熒光反應(yīng)，第5天時(shí)熒光數(shù)量明顯增多，第7天達(dá)到高峰，第9天與第7天變化不明顯。從細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率來(lái)看，不同的MOI值效果不同，MOI值為5和10時(shí)轉(zhuǎn)染效率較高。這表明在使用Lentivirus載體轉(zhuǎn)染許旺細(xì)胞時(shí)，優(yōu)化MOI值可以提高轉(zhuǎn)染效率。同時(shí)，未提及該轉(zhuǎn)染過(guò)程對(duì)細(xì)胞死亡的影響，但可以通過(guò)進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)，如細(xì)胞活性檢測(cè)等，來(lái)確定在提高轉(zhuǎn)染效率的同時(shí)對(duì)細(xì)胞死亡的影響。選擇適合的 RNA 轉(zhuǎn)染試劑是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，需要綜合考慮多個(gè)因素。吉林廈門轉(zhuǎn)染試劑

脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是一種常用的將外源基因?qū)爰?xì)胞的方法，脂質(zhì)體大?。褐|(zhì)體的大小也可能影響轉(zhuǎn)染效率。較小的脂質(zhì)體可能更容易進(jìn)入細(xì)胞，但可能攜帶的 DNA 量較少。較大的脂質(zhì)體可能攜帶更多的 DNA，但可能更難進(jìn)入細(xì)胞。研究發(fā)現(xiàn)，陽(yáng)離子脂質(zhì)體的大小與轉(zhuǎn)染效率之間存在一定的關(guān)系。隨著脂質(zhì)體尺寸的增加，轉(zhuǎn)染的主要途徑可能從網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的內(nèi)吞作用轉(zhuǎn)變?yōu)橹そ閷?dǎo)的內(nèi)吞作用，同時(shí)也可能觀察到巨胞飲作用。這種變化可能會(huì)影響脂質(zhì)體在細(xì)胞內(nèi)的運(yùn)輸和釋放，從而影響轉(zhuǎn)染效率。山東轉(zhuǎn)染試劑提高 RNA 轉(zhuǎn)染效率是 RNA 研究領(lǐng)域中的重要課題。

考慮多因子轉(zhuǎn)染能力如果實(shí)驗(yàn)需要同時(shí)轉(zhuǎn)染多個(gè)RNA分子或進(jìn)行共轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)，那么選擇具有多因子轉(zhuǎn)染能力的試劑是重要的。共轉(zhuǎn)染效果：一些轉(zhuǎn)染試劑可以有效地實(shí)現(xiàn)多個(gè)RNA分子的共轉(zhuǎn)染，而另一些試劑可能在共轉(zhuǎn)染方面效果不佳。在脂質(zhì)體方法用于modRNA轉(zhuǎn)染各種類型細(xì)胞的初步研究中，MessageMax能將modGFP高效轉(zhuǎn)染入多種細(xì)胞中，并實(shí)現(xiàn)modGFP和modmCherry在MEF細(xì)胞中的共轉(zhuǎn)及核內(nèi)因子nGFP和mTBX5在MEF細(xì)胞核中的定位5。選擇適合多因子轉(zhuǎn)染的試劑：根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，選擇能夠滿足多因子轉(zhuǎn)染要求的轉(zhuǎn)染試劑。例如，如果實(shí)驗(yàn)需要同時(shí)轉(zhuǎn)染多個(gè)基因或進(jìn)行基因編輯實(shí)驗(yàn)，那么選擇具有多因子轉(zhuǎn)染能力的轉(zhuǎn)染試劑可以提高實(shí)驗(yàn)效率。

考慮細(xì)胞毒性低細(xì)胞毒性的轉(zhuǎn)染試劑對(duì)于保持細(xì)胞的活性和正常生理功能至關(guān)重要。評(píng)估細(xì)胞活力：可以通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞的存活率、增殖能力等指標(biāo)來(lái)評(píng)估轉(zhuǎn)染試劑的細(xì)胞毒性。在研究不同轉(zhuǎn)染試劑對(duì)C2C12細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率時(shí)，通過(guò)優(yōu)化DNA:轉(zhuǎn)染劑比例和細(xì)胞密度，使所有試劑在達(dá)到較高轉(zhuǎn)染效率的同時(shí)，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和活力的影響有限6。在比較不同轉(zhuǎn)染試劑遞送siRNA的攝取、敲低效率和毒性情況的研究中，新開(kāi)發(fā)的CALNPRNAi轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染效率***高于傳統(tǒng)轉(zhuǎn)染試劑，同時(shí)毒性比較低7。選擇溫和的試劑：一些轉(zhuǎn)染試劑可能對(duì)細(xì)胞的毒性較小，例如基于脂質(zhì)的轉(zhuǎn)染試劑通常比基于病毒的轉(zhuǎn)染試劑更溫和。在顱內(nèi)遞送合成mRNA的研究中，使用常用的轉(zhuǎn)染試劑將合成mRNA遞送至小鼠大腦，結(jié)果表明該模型中合成mRNA可以成功遞送至大腦，且沒(méi)有可測(cè)量的毒性8。提高 RNA 轉(zhuǎn)染試劑的轉(zhuǎn)染效率同時(shí)降低細(xì)胞死亡。

    RNA轉(zhuǎn)染試劑在不同細(xì)胞類型中的效果存在***差異。以下將詳細(xì)闡述不同細(xì)胞類型對(duì)RNA轉(zhuǎn)染試劑效果的具體影響。腎*細(xì)胞系786-O和ACHN：微小RNA-1180（miR-1180）轉(zhuǎn)染對(duì)腎*細(xì)胞系786-O和ACHN生長(zhǎng)有影響。實(shí)時(shí)定量（qRT）-PCR檢測(cè)顯示轉(zhuǎn)染miR-1180后，786-O和ACHN細(xì)胞中p21mRNA水平分別上調(diào)。Westernblot檢測(cè)表明p21蛋白表達(dá)趨勢(shì)與qRT-PCR結(jié)果相符，同時(shí)細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶（CDK）4、CDK6和CyclinD1蛋白的表達(dá)明顯下調(diào)。流式細(xì)胞術(shù)（FCM）結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染miR-1180后，位于G0/G1期的細(xì)胞比例明顯增大，而位于S期和G2/M期的細(xì)胞比例明顯下降，表明細(xì)胞周期被阻滯在G0/G1期。MTS結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染miR-1180后，兩種腎*細(xì)胞活力明顯降低。集落形成實(shí)驗(yàn)顯示miR-1180組的集落數(shù)數(shù)量明顯較少，表明細(xì)胞增殖能力降低1。HeLa細(xì)胞：兩種常見(jiàn)的RNA干擾（RNAi）轉(zhuǎn)染試劑DharmaFECT1和INTERFERin，在使用非靶向siRNAs的模擬轉(zhuǎn)染中，會(huì)引起HeLa細(xì)胞脂質(zhì)組的改變。一些脂質(zhì)對(duì)兩種可能化學(xué)性質(zhì)不同的轉(zhuǎn)染試劑都有反應(yīng)，而其他脂質(zhì)種類只對(duì)其中一種試劑有反應(yīng)。雖然這些脂質(zhì)組改變的功能影響尚待研究，但實(shí)驗(yàn)表明在RNAi實(shí)驗(yàn)中使用適當(dāng)?shù)哪M轉(zhuǎn)染對(duì)照非常重要，比較好輔以正交擾動(dòng)。 作為一般指導(dǎo)原則，建議使用早期傳代的細(xì)胞以獲得良好的轉(zhuǎn)染效率，特別是涉及原代或干細(xì)胞的轉(zhuǎn)染。河北DOTAP 轉(zhuǎn)染試劑

deae-葡聚糖是一種化學(xué)修飾的葡聚糖類似物。吉林廈門轉(zhuǎn)染試劑

在人類多能干細(xì)胞衍生的心肌細(xì)胞（HPSC-CMs）中的應(yīng)用低轉(zhuǎn)染效率是實(shí)現(xiàn)HPSC-CMs在疾病建模和心臟修復(fù)研究中廣泛應(yīng)用的障礙。通過(guò)優(yōu)化四個(gè)基本參數(shù)，即血清補(bǔ)充劑、復(fù)制和轉(zhuǎn)染之間的時(shí)間、試劑與DNA比以及細(xì)胞密度，使用Promega的Viafect?轉(zhuǎn)染試劑能夠?qū)PSC-CMs轉(zhuǎn)染至約95%的效率28。盡管活力有所降低，但轉(zhuǎn)染后的HPSC-CMs仍保持了高純度和結(jié)構(gòu)完整性，確保了至少14天的轉(zhuǎn)染基因持續(xù)表達(dá)，為心臟相關(guān)疾病的研究開(kāi)辟了新機(jī)遇。在C2C12細(xì)胞中的應(yīng)用C2C12細(xì)胞在肌肉領(lǐng)域***使用，但它們和原代成肌細(xì)胞一樣難以轉(zhuǎn)染，影響了下游實(shí)驗(yàn)。雖然自2015年以來(lái)超過(guò)95%的使用C2C12細(xì)胞的報(bào)告使用了一種金標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)染劑（如Lipofectamine®），但有研究表明其效率低于30%。通過(guò)比較五種商業(yè)試劑（Lipofectamine®3000、Viafect?、Fugene®HD、C2C12CellAvalanche®和JetOPTIMUS®）在C2C12細(xì)胞中的轉(zhuǎn)染效率，發(fā)現(xiàn)通過(guò)優(yōu)化DNA:轉(zhuǎn)染劑比例和細(xì)胞密度，所有試劑都能達(dá)到超過(guò)60%的轉(zhuǎn)染效率，且對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和活力影響有限。這些試劑還能在C2C12細(xì)胞中轉(zhuǎn)染后高效生成GFP陽(yáng)性的肌管，但在轉(zhuǎn)染siRNA和對(duì)原代肌肉細(xì)胞的轉(zhuǎn)染中表現(xiàn)出較低效率和較高毒性3。吉林廈門轉(zhuǎn)染試劑