2025-01-22 06:02:45
組織切片是病理學診斷上面必要的過程,但你以為檢體只有做成石蠟包埋切片,然后染H&E染色后診斷一個方法嗎?其實在組織病理上還有很多不同的包埋及切片方法,配上各種原理不同的染色法,就可以進行各式各樣的組織分析。***,我們整理了常用的組織病理學切片技術及染色方法,供大家對切片技術上有更多的認識~因應各種不同的診斷及實驗需求,選擇適合的染色,才能取得比較好的結果。????H&E:觀察組織「形態(tài)」的標準染色方法,是組織學中**重要、**常被使用的化學染色方法。????特殊化學染色:種類繁多,針對各種不同的組織細胞生化特性,有多種不同的染色可以應用。常見的染色方法包括蘇木精-伊紅染色(H&E)。南京Masson染色外包
魯士藍染色(Prussian Blue Staining)是一種常用的組織化學染色方法,主要用于檢測和定位組織中的鐵沉積。這種染色方法能夠?qū)⑷齼r鐵離子(Fe??)還原為二價鐵離子(Fe??),并與亞鐵**鉀反應生成不溶性的藍色沉淀物——普魯士藍(Prussian Blue)。這種方法在病理學、血液學和神經(jīng)科學等領域有廣泛應用。魯士藍染色的基本原理1. 鐵離子的還原:?在酸性條件下,三價鐵離子(Fe??)被還原成二價鐵離子(Fe??)。2. 與亞鐵**鉀反應:?二價鐵離子(Fe??)與亞鐵**鉀(K?[Fe(CN)?])反應,生成不溶性的普魯士藍沉淀物。?反應方程式:[ ext{Fe}^{2+} + K_4[ ext{Fe(CN)}_6] ightarrow ext{Fe}_4[ ext{Fe(CN)}_6]_3 + 4K^+ ]南京免疫熒光染色結果分析Periodic Acid-Schiff (PAS)染色用于檢測糖類物質(zhì)。
病理染色切片過程中值得注意的是1%伊紅水溶液是理想的胞漿染液。要選擇好水溶性的伊紅染料使胞質(zhì)鮮艷一些,切片不但漂亮且利于觀片。(9)切片染色后的脫水要充分,每道乙醇脫水的時間不要過短,尤其是三道無水乙醇更為如此。無水乙醇要勤更換。(10)切片經(jīng)***一次無水乙醇后盡快地放人二甲苯中。在夏季室內(nèi)濕度較大的環(huán)境中更是如此。如切片在濕度大的空氣中停留時間過長就會在封片時產(chǎn)生霧氣,而不能現(xiàn)片。其原因是無水乙醇吸收了空氣中的水汽,在二甲苯中難以分離析出,當用中性樹膠封片后,二甲苯揮發(fā),而水汽留在膠中產(chǎn)生霧氣。(11)封片所使蓋玻片需大小合適、清潔。樹膠用量視蓋玻片大小而定,要求不發(fā)生溢膠或缺如。(12)不提倡切片經(jīng)無水乙醇,然后干燥,直接用中性樹膠封固。這樣會產(chǎn)生人為的細小黑點,與細胞核相似。(13)封片要在通風廚中進行,防止二甲苯污染工作間,危害技師的身體。
3. 普魯士藍反應:?用蒸餾水清洗切片后,將其浸入含有亞鐵**鉀(K?[Fe(CN)?])的溶液中,在室溫下孵育一段時間(通常是10-20分鐘),形成普魯士藍沉淀。4. 復染:?為了更好地觀察組織結構,通常會進行復染,例如使用蘇木精染色(Hematoxylin)。5. 脫水、透明和封片:?用乙醇梯度脫水,然后用二甲苯透明處理,***用中性樹膠封片。6. 顯微鏡觀察:?在顯微鏡下觀察染色后的切片,藍色沉淀表示鐵的存在。優(yōu)點?特異性高:魯士藍染色對鐵離子具有高度特異性,能夠準確地檢測和定位鐵沉積。?操作簡便:染色步驟相對簡單,不需要復雜的儀器設備。?結果直觀:染色后的鐵沉積呈現(xiàn)明顯的藍色,易于觀察和分析。Nissl染色用于顯示神經(jīng)元的尼氏體。
比如Masson染色:?原理:利用不同染料區(qū)分肌肉、膠原纖維和細胞質(zhì)。通常,肌肉染成紅色,膠原纖維染成藍色或綠色,細胞質(zhì)染成紅色。?應用:用于研究結締組織和纖維化病變。1.PAS染色(過碘酸-Schiff反應):?原理:檢測糖原和其他多糖類物質(zhì),使其呈現(xiàn)紫紅色。?應用:用于診斷糖原貯積病和******。1.銀染色:?原理:利用銀鹽沉淀顯示神經(jīng)纖維和細胞外基質(zhì)。?應用:用于神經(jīng)組織和結締組織的研究。
英瀚斯生物熟練掌握多種常規(guī)染色和特殊染色技術。 Von Kossa染色用于檢測鈣鹽沉積。南京Van Gieson染色結果分析
染色切片可以幫助識別病原體。南京Masson染色外包
病理染色的主要步驟?取材:從***或尸體上獲取所需的組織樣本。?固定:使用福爾馬林或其他固定劑固定組織,以保持其原有的結構。?脫水:用酒精或其他脫水劑去除組織中的水分。?透明化:用二甲苯或其他透明劑處理組織,使其透明。?包埋:將透明化的組織放入石蠟中,制成硬塊。?切片:用切片機將石蠟塊切成薄片(通常為4-5微米厚)。?貼片:將切片貼在載玻片上,并進行烘烤使其牢固。?脫蠟:用二甲苯去除切片上的石蠟。?復水:用酒精梯度逐步將切片重新水化。?染色:根據(jù)需要選擇合適的染色方法進行染色。?封片:用封片劑覆蓋切片,防止染色脫落,并便于長期保存和觀察。南京Masson染色外包